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看完這些你就知道什么是Millipore PVDF膜了
更新時(shí)間：2021-05-12 | 點(diǎn)擊率：5301
Millipore PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白質(zhì)印跡法中常用的一種固相支持物。PVDF膜是疏水性的，膜孔徑有大有小，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對(duì)低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固。
PVDF膜是一種聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene Fluoride, PVDF)印跡膜。最常見(jiàn)用于免疫印跡(immunoblot, 即Western blot)時(shí)蛋白從膠到膜的轉(zhuǎn)印，也可用于吸附分析、氨基酸分析、N端蛋白質(zhì)測(cè)序、點(diǎn)和狹縫印跡檢測(cè)(dot and slot blot)、糖蛋白顯色和脂多糖分析等。
本PVDF膜0.2μm適用于大多數(shù)的免疫印跡，特別適用于分子量小于20kDa的蛋白質(zhì)，可以有效減少小分子量蛋白的滲漏。本產(chǎn)品比0.45μm PVDF膜具有更高的蛋白質(zhì)吸附率和蛋白測(cè)序得率，例如對(duì)于胰島素、BSA的吸附能力分別是常用的0.45μm PVDF膜的約1.64倍和1.58倍。
與硝酸纖維素膜(Nitrocellulose membrane, NC膜)相比，PVDF膜具有多種優(yōu)點(diǎn)。PVDF膜具有很高的機(jī)械強(qiáng)度，不易破裂或卷曲;具有背景低、溶劑相容性廣，以及著色能力優(yōu)異等優(yōu)點(diǎn);此外，PVDF膜經(jīng)適當(dāng)處理后還可以重復(fù)檢測(cè)。
PVDF本質(zhì)是一種疏水性的聚合物，在水溶液中不會(huì)浸濕，為了在水性緩沖液和系統(tǒng)中使用PVDF膜，首先必須將其浸泡在50%(v/v)或更高濃度的醇溶液中。
(PVDF膜在使用時(shí)需預(yù)處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團(tuán)，使其更容易與帶負(fù)電的蛋白結(jié)合。)甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。隨著膜的外觀從不透明到半透明，*浸濕是顯而易見(jiàn)的。之后必須用水反復(fù)沖洗以去除醇類，經(jīng)預(yù)處理的膜可以直接放入轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡。
一旦膜被浸濕，蛋白結(jié)合可通過(guò)蛋白與膜的接觸而實(shí)現(xiàn)。由于蛋白與膜的結(jié)合貫穿整個(gè)膜的厚度(深度)，結(jié)合能力是由孔的內(nèi)部表面積來(lái)決定的，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對(duì)低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固。
0.2um PVDF膜內(nèi)部表面積大約是0.45um PVDF 膜的三倍，使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的，一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。
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