日本黄色三级视频-日本黄色片一级-日本黄色片www-日本黄色免费在线视频-草草影院浮力-草草影视在线观看

電話咨詢:
010-50973130
技術文章
當前位置:首頁 > 技術文章 > 了解DiI 細胞膜橙色熒光探針的原理和使用

了解DiI 細胞膜橙色熒光探針的原理和使用

更新時間:2025-07-23  |  點擊率:447

DiI即DiIC18(3),全稱為1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate,是常用的細胞膜熒光探針之一,呈現橙紅色熒光。DiI是一種親脂性膜染料,進入細胞膜后可以側向擴散逐漸使整個細胞的細胞膜被染色。
DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱,僅當進入到細胞膜后才可以被激發出很強的熒光。DiI被激發后可以發出橙紅色的熒光,DiI和磷酯雙層膜結合后的激發光譜和發射光譜。其中,最大激發波長為549nm,最大發射波長為565nm。
DiI可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發現較難溶解時可以適當加熱,并用超聲處理以促進溶解。
DiI被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-termtracer)。DiI通常不會影響細胞的生存力(viability)。被DiI標記的神經細胞在體外培養的條件下可以存活長達4周,在體內可以長達一年。DiI在經過固定的神經元細胞膜上的遷移速率為0.2-0.6mm/day,在活的神經元細胞膜上的的遷移速率為6mm/day。
DiI除了簡單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發育或移植過程中細胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
用于細胞膜熒光標記時,DiI的常用濃度為1-25μM,常用的濃度為5-10μM。DiI可以直接染色活的細胞或組織,染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進行固定,使用其它不適當的固定液會導致熒光背景較高。
1. DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS 細胞膜染色液制備
(1) 配置 DMSO 或 EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO 或 EtOH 配置濃度 1~5 mM。
(2) 注意:未使用的儲存液保存在-20℃,避免反復凍融。 (3) 工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS 或 PBS)稀釋儲存液,配制濃度為 1~5µM 的工 作液。   注意:工作液的最終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制。可以從推薦濃度的十倍以上尋找最佳條件。
2. 懸浮細胞染色
(1) 懸浮細胞密度為 1 × 106/mL 加入到工作液中。
(2) 在 37 ℃培養細胞 2~20 分鐘,不同的細胞最佳培養時間不同。
(3) 染色細胞試管在 1000~1500 轉離心 5 分鐘。
(4) 傾倒上清液,再次緩慢加入預溫 37℃的培養液。
(5) 重復(3),(4)步驟兩次以上。
3. 粘壁細胞的染色
(1) 使粘壁的細胞在無菌實驗室培養。
(2) 從培養基中移走蓋玻片,吸走過量培養液,將蓋玻片放在潮濕的環境中。
(3) 在蓋玻片的一角加入 100µL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。
(4) 在 37 ℃培養細胞 2~20 分鐘,不同的細胞最佳培養時間不同。
(5) 吸干染料工作液,用培養液洗蓋玻片 2~3 次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,培養 5~10 分鐘,然 后吸干培養基。

 備注:產品信息可能會有優化升級。請以實際標簽信息為準。






午夜在线亚洲| 国产91精品系列在线观看| 四虎影视精品永久免费网站 | 国产极品白嫩美女在线观看看| 午夜欧美成人久久久久久| 天天做人人爱夜夜爽2020 | 欧美日本二区| 天天做人人爱夜夜爽2020 | 亚洲第一页乱| 亚洲精品影院| 四虎精品在线观看| 欧美一级视频免费观看| 免费的黄色小视频| 精品国产一区二区三区久| 久草免费在线视频| 久久国产精品自线拍免费| 精品久久久久久中文字幕一区| 日日日夜夜操| 日韩男人天堂| 精品视频一区二区三区免费| 日本久久久久久久 97久久精品一区二区三区 狠狠色噜噜狠狠狠狠97 日日干综合 五月天婷婷在线观看高清 九色福利视频 | 久久99中文字幕久久| 日韩一级黄色大片| 在线观看成人网| 精品国产一区二区三区精东影业 | 欧美日本免费| 欧美一级视频免费| 青青青草视频在线观看| 欧美激情伊人| 亚洲爆爽| 高清一级毛片一本到免费观看| 韩国毛片免费| 欧美夜夜骑 青草视频在线观看完整版 久久精品99无色码中文字幕 欧美日韩一区二区在线观看视频 欧美中文字幕在线视频 www.99精品 香蕉视频久久 | 中文字幕一区二区三区精彩视频| 欧美大片一区| 高清一级毛片一本到免费观看| 九九精品在线| 日韩av片免费播放| 99色视频| 国产不卡福利| 国产伦理精品| 韩国三级香港三级日本三级| 日韩在线观看视频免费| 一本伊大人香蕉高清在线观看| 韩国毛片免费大片| 日韩中文字幕一区二区不卡| 成人影视在线播放| 你懂的国产精品| 亚欧乱色一区二区三区| 久草免费在线视频| 亚洲天堂在线播放| 中文字幕一区二区三区精彩视频| 日日爽天天| 国产一区免费在线观看| 欧美日本二区| 成人免费一级纶理片| a级黄色毛片免费播放视频| 欧美激情一区二区三区在线 | 成人免费观看男女羞羞视频| 亚欧成人毛片一区二区三区四区 | 精品国产亚洲一区二区三区| 免费国产一级特黄aa大片在线| 一级毛片视频免费| 欧美日本免费| 免费毛片播放| 99热精品一区| 香蕉视频一级| 国产麻豆精品免费视频| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 成人高清护士在线播放| 国产成a人片在线观看视频| 日韩一级黄色片| 国产精品123| 黄色免费网站在线| 欧美另类videosbestsex久久| 可以免费看毛片的网站| 一本高清在线| 在线观看成人网 | 国产91精品露脸国语对白| 四虎久久影院| 成人影视在线播放| 欧美另类videosbestsex视频| 高清一级淫片a级中文字幕| 精品久久久久久免费影院| 色综合久久天天综合| 国产不卡精品一区二区三区| 超级乱淫黄漫画免费| 精品国产一区二区三区免费 | 午夜激情视频在线观看 | 日韩欧美一及在线播放| 好男人天堂网 久久精品国产这里是免费 国产精品成人一区二区 男人天堂网2021 男人的天堂在线观看 丁香六月综合激情 | 日韩专区第一页| 国产视频久久久| 成人影视在线播放| 韩国毛片基地| 色综合久久手机在线| 日韩av东京社区男人的天堂| 国产美女在线观看| 国产精品免费久久| 欧美激情一区二区三区在线 | 国产亚洲男人的天堂在线观看| 久久国产影院| 欧美日本韩国| 国产成人啪精品| 99热精品在线| 美女免费精品高清毛片在线视 | 日本免费乱理伦片在线观看2018| 精品国产一区二区三区国产馆| 日韩av东京社区男人的天堂| 国产成人精品影视| 日韩专区在线播放| 高清一级片| 久久国产一区二区| 日本在线不卡免费视频一区| 国产一区二区福利久久| 久久久久久久免费视频| 久久国产一区二区| 超级乱淫伦动漫| 欧美激情中文字幕一区二区| 国产成人精品综合久久久| 天天色成人| 国产成a人片在线观看视频| 成人免费一级纶理片| 天天做人人爱夜夜爽2020 | 精品国产一区二区三区久久久狼| 免费一级片在线观看| 亚洲天堂在线播放| 精品在线观看国产| 久久国产影视免费精品| 麻豆污视频| 欧美激情一区二区三区视频 | 国产一区精品| 日韩中文字幕在线亚洲一区 | 91麻豆精品国产高清在线| 日本伦理片网站| 精品视频一区二区三区免费| 免费一级片在线观看| 一级毛片看真人在线视频| 午夜激情视频在线观看 | 成人高清视频在线观看| 高清一级淫片a级中文字幕| 亚欧乱色一区二区三区| 美国一区二区三区| 国产视频一区二区在线观看 | 国产网站在线| 久久久成人影院| 国产一区精品| 日本在线不卡视频| 国产美女在线观看| 久久99欧美| 国产91精品露脸国语对白| 成人a大片在线观看| 欧美大片毛片aaa免费看| 日韩中文字幕一区| 国产视频一区二区在线观看 | 午夜欧美成人香蕉剧场| 国产视频久久久| 成人免费一级毛片在线播放视频| 成人影视在线观看| 亚洲女初尝黑人巨高清在线观看| 欧美另类videosbestsex视频| 国产视频一区在线| 亚洲爆爽| 国产不卡福利| 久草免费在线视频| 天天色成人| 色综合久久天天综合| 国产不卡在线观看| 99久久网站| 国产不卡高清| 日本特黄特色aa大片免费| 欧美电影免费| 国产国语对白一级毛片| 日韩专区一区| 黄视频网站在线免费观看| 黄色免费三级| 韩国三级香港三级日本三级| 国产a毛片| 亚洲精品影院| 成人影院久久久久久影院| 99热精品在线| 日韩专区在线播放| 亚欧视频在线| 黄色短视频网站| 午夜精品国产自在现线拍| 午夜欧美成人久久久久久| 亚洲天堂在线播放| 91麻豆精品国产高清在线| 毛片电影网| 亚洲天堂在线播放| 四虎久久影院| 夜夜操天天爽| 久久精品大片| 日韩在线观看免费完整版视频| 亚洲天堂免费观看| 天堂网中文字幕| 国产视频在线免费观看| 精品久久久久久综合网| 久久福利影视| 久久国产一久久高清|